[Kit para extração e purificação de RNA] com colunas de sílica] – 50 e 250 extrações – RUO, 13-BR850

gestor — Sun, 02 Jul 2023 18:02:21 +0000

Reagentes para Extração e Purificação de RNA
Código: 13-BR850-50
Apresentação: 50 extrações

Instruções de Uso

1. Uso Pretendido

Os reagentes utilizam colunas de sílica (cartuchos/filtro) para extração e purificação de RNA. Recomendados para amostras de:

Sangue total
Plasma
Soro
Urina
Culturas de células
Amostras coletadas via swab nasofaríngeo

2. Características do Produto

Sistema genérico baseado em colunas de sílica de alta capacidade.
Compatível com diagnóstico in vitro (qPCR, RT-qPCR).
Inclui Proteinase K para lise de proteínas e Carreador de RNA para otimização.

Composição do Produto (50 extrações):

Componente	Volume	Quantidade
Hemalise-RBC 10X	9,0 mL	1
Carreador de RNA liofilizado	–	1
Proteinase K (PK) liofilizada	–	1
Diluente PA/PK	1,0 mL	1
Tampão de Lise	20,0 mL	1
Tampão de Lavagem A	16,5 mL	1 (concentrado)
Tampão de Lavagem B	9,0 mL	1 (concentrado)
Tampão de Eluição	2,5 mL	1
Colunas de Sílica	–	50 unidades
Tubos Coletores	–	50 unidades

Especificações:

Alta eficiência com amostras respiratórias, sangue, e meios de transporte.
RNA purificado adequado para aplicações moleculares.

Equipamentos Necessários (não fornecidos):

Centrífuga (20.000 x g ou 14.000 rpm)
Micropipetas (1-1000 µL) e ponteiras descartáveis com filtro
Vórtex
Bloco de aquecimento (56°C), banho-maria ou estufa
Etanol absoluto (95-100%)
Tubos tipo Falcon e microtubos

3. Preparo dos Reagentes

Proteinase K: Diluir com 500 µL do Diluente PA/PK. Armazenar a -20°C após reconstituição. Usar 10 µL por extração.
Carreador de RNA: Diluir com 250 µL do Diluente PA/PK. Usar 5 µL por extração.
Hemalise 1X: Diluir 1 parte de Hemalise-RBC 10X em 9 partes de água ultrapura.

Tampões de Lavagem: Adicionar etanol absoluto antes do uso:

Componente	Etanol a adicionar	Volume Final
Tampão de Lavagem A	13,5 mL	30,0 mL
Tampão de Lavagem B	21,0 mL	30,0 mL

4. Armazenamento e Transporte

Temperatura ambiente (10-30°C).
Estáveis até a data de validade na embalagem.
Para precipitados nos tampões, aquecer a 55-65°C até dissolução completa.

Validade: 12 meses.

5. Segurança

Uso exclusivo por profissionais treinados.
Equipamentos de proteção individual são obrigatórios.
Ambiente de laboratório controlado.
Não usar componentes danificados ou vencidos.
Trabalhar em fluxo laminar para evitar contaminações cruzadas.

6. Procedimento Geral

Preparo da Amostra:
- Sangue total: 200 µL + 1,8 mL de Hemalise 1X.
- Urina: Centrifugar 2 mL e usar o pellet.
Extração e Purificação:
- Adicionar tampão de lise, Proteinase K e carreador.
- Incubar, centrifugar, e aplicar nas colunas de sílica conforme protocolo detalhado.

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