Controle Positivo – RNA sintético ZIKV RGN

Controle Positivo – RNA sintético ZIKV RGN

RNA sintético de Zika vírus, isolado Rio Grande do Norte, que é utilizado para preparação da curva padrão com 5 pontos para identificação de amostras positivas para Zika vírus.

Descrição:
Zika virus (ZIKV) é um membro da família Flaviviridae do gênero Flavivirus. Em humanos, é transmitido através da
picada do mosquito Aedes aegypti, causa a doença também conhecida como zica – que embora raramente
acarrete complicações para seu portador, apresenta indícios de poder causar microcefalia congênita. O nome
Zica tem sua origem na floresta de Zika, perto de Entebbe na República de Uganda, onde o vírus foi isolado pela
primeira vez em 1947. O zika vírus está relacionado com os vírus da dengue, da febre amarela e vírus do Nilo
ocidental, os quais igualmente fazem parte do gênero Flavivirus.

O Zika virus possui um genoma de RNA não segmentado de cadeia simples de aproximadamente 10,8 kilobases.

Em 2007, um surto de infecção por zika virus foi reportado na ilha de Yap da Federação dos Estados da Micronésia, região do Pacífico (Genetic and Serologic Properties of Zika Virus Associated with an Epidemic, Yap State, Micronesia, 2007; Lanciotti e colaboradores; Emerg Infect Dis. 2008 Aug;14(8):1232-9).

Um dos maiores surtos de zika vírus da história ocorreu entre 2013 e 2014 na Polinésia Francesa.

Atualmente, o Brasil vem enfrentando um grande surto de zika vírus com aumento do número de casos de
microcefalia congênita (Zika Virus Outbreak, Bahia, Brazil.

Campos GS, Bandeira AC, Sardi SI. Emerg Infect Dis. 2015 Oct;21(10):1885-6).

Em 2016, foram publicadas no GenBank as primeiras sequências completas do genoma de zika vírus isolado a
partir de amostras brasileiras.

Assim sendo, o BR ZIKV – Set de Primers e Sonda FAM apresenta um conjunto de primers (direto e reverso) e
sonda fluorescente marcada com FAM na extremidade 5’ e NFQ (non-fluorescent quencher) na extremidade 3’
possuindo 100% de homologia com as seguintes sequências de zika vírus isolado a partir de amostras brasileiras:

Zika virus isolate Brazil-ZKV2015, complete genome GenBank: KU497555.1

Zika virus strain ZikaSPH2015, complete genome GenBank: KU321639.1

Zika virus isolate SSABR1, complete genome GenBank: KU707826.1

Zika virus strain Natal RN, complete genome GenBank: KU527068.1

Recomenda-se trabalhar com este conjunto de reagentes – BR ZIKV Primers and FAM Probe Set

• Concentração dos Primers: 40 µM
• Concentração da Sonda Fluorescente: 10 µM
• Volume dos Primers e Sonda em solução TE pH 8.0:
• Microtubo com 10 µL (20 reações) e 100 µL (200 reações)

Indicação de Uso: Aplicar 0,5 µL do reagente BR ZIKV Primers and FAM Probe Set (primers e sondas) em uma
reação de RT-qPCR com volume final de 25 µL.

CONTROLE POSITIVO ZIKV, para ser utilizado com o set de primers e sonda supra-citado. Trata-se de um RNA
sintético produzido in vitro correspondente à sequência genética do Zika virus strain Natal RGN (GenBank:
KU527068.1) na concentração estimada de 500 cópias / µL.

Aplicar 5-10 µL do controle positivo em uma reação de RT-qPCR com volume final de 25 µL.

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