Kit de extração magnético manual – 250 extrações – SKU: 13-BR500-25

Kit de Extração EC-XTRACT

Modelo: 13-BR500-25

Registro ANVISA
REG.: 81867910005

Instruções de Uso

1. Uso pretendido

O Kit de Extração EC-XTRACT – Modelo: 13-BR500-25 é indicado para a extração de DNA/RNA a partir de amostras biológicas, de acordo com as recomendações do usuário.

• Rendimento: 250 extrações
• Uso: EXCLUSIVO PARA DIAGNÓSTICO IN VITRO.

1.1 Aplicação em Biologia Molecular

• Extração de ácido nucléico para:
  • Sequenciamento
  • RT-PCR
  • PCR
  • Reações enzimáticas

2. Características do Produto

O Kit de Extração EC-XTRACT – Modelo: 13-BR500-25 é composto por:

2.1 Especificações

A solução de lise do EC-XTRACT desnatura proteínas, contaminantes e detritos das amostras, liberando os ácidos nucléicos. Em seguida, o RNA/DNA em suspensão na solução é capturado pelas beads magnéticas. As beads aderidas ao RNA/DNA são capturadas por um ímã (rack magnética). Os contaminantes são removidos através de repetidos processos de lavagem. Finalmente, os ácidos nucléicos são dissociados das beads magnéticas e eluídos em tampão apropriado.

2.2 Tipos de amostras

Amostras de soro, sangue, plasma, fluidos corporais, vírus, bactérias, suspensões de células, fezes, tecidos biológicos previamente tratados e homogeneizados, e amostras colhidas em cotonetes acondicionados em solução conservante podem ser trabalhadas com estes insumos.

3. Armazenamento

• Temperatura: Entre 2°C e 8°C.
• Não congelar.

4. Validade

O Kit de Extração EC-XTRACT – Modelo: 13-BR500-25 tem validade de 12 meses quando mantido fechado e armazenado corretamente.

5. Informação de Segurança

• O kit EC-XTRACT é destinado exclusivamente às práticas de laboratório para a purificação de DNA/RNA viral em rack magnética. O uso indevido é de responsabilidade exclusiva do usuário.
• Sempre utilizar EPIs conforme normas de segurança regulamentadas ao manusear soluções químicas e amostras biológicas.
• Evitar contato dos reagentes com olhos, pele e roupa. Em caso de contato, lavar abundantemente com água corrente. Procurar um médico se ocorrer reação alérgica ou efeito adverso.
• Verificar as embalagens dos componentes ao receber o kit. Não usar componentes danificados.
• Trocar as ponteiras entre transferências de líquidos para evitar contaminação cruzada.
• Não misturar componentes de kits diferentes se não forem do mesmo lote.
• Este kit deve ser usado apenas por pessoal treinado.
• Armazenar os químicos e plásticos em condições próprias para uso em laboratório.
• Tratar resíduos como material infeccioso e manusear conforme normas de segurança regulamentadas.

6. Procedimento

6.1 Preparação das amostras

• Sangue total: Utilizar 100 μL de sangue com anticoagulante.
• Soro e/ou plasma: Utilizar 200 μL da amostra.
• Tecidos: Diluir 100 mg de amostra de tecido em 1 mL de solução salina, triturar mecanicamente, centrifugar a 7.000 rpm por 5 minutos e usar o sobrenadante.
• Saliva e amostras nasofaríngeas: Utilizar 300 μL de amostra em solução de coleta diretamente na solução de extração.
• Amostras do ambiente: Coletar com swab de algodão, acondicionar em 500 μL de solução salina, centrifugar a 7.000 rpm por 5 minutos e usar o sobrenadante.

6.2 Procedimento para extração com uso de rack Magnética

1. Em um microtubo de 2 mL, adicionar 447 μL de Solução de Lise para cada 300 μL de amostra.
2. Homogeneizar manualmente as beads magnéticas e adicionar 15 μL em cada microtubo com amostra.
3. Homogeneizar por 30 segundos em vortex e incubar a 65°C por 10 minutos, vortexando a cada 2 minutos por 20 segundos.
4. Colocar o microtubo na rack magnética por 10 minutos até que as beads se prendam na parede do tubo, deixando o sobrenadante transparente.
5. Aspirar completamente o líquido com micropipeta, evitando contato com as beads.
6. Adicionar 300 μL de Solução de Ligação e homogeneizar por 30 segundos.
7. Colocar o microtubo na rack magnética por 5 minutos até que as beads se prendam na parede do tubo.
8. Aspirar completamente o líquido com micropipeta, evitando contato com as beads.
9. Adicionar 400 μL de Solução de Lavagem e homogeneizar por 30 segundos.
10. Colocar o microtubo na rack magnética por 5 minutos até que as beads se prendam na parede do tubo.
11. Aspirar completamente o líquido com micropipeta, evitando contato com as beads.
12. Repetir o processo de lavagem do passo 9 a 11 mais uma vez.
13. Deixar o microtubo na rack magnética por 5 minutos para evaporar os líquidos residuais.
14. Adicionar 50 μL de Eluição e homogeneizar por 15 segundos.
15. Colocar o tubo na rack magnética por 2 minutos.
16. Transferir o líquido com o DNA/RNA extraído para um novo microtubo.

• O RNA/DNA extraído deve ser armazenado entre 2°C e 8°C por até 12 horas. Após este período, armazenar a -20°C ou por longos períodos a -80°C.

8. Equipamento, reagentes e insumos necessários, mas não fornecidos

• O EC-XTRACT pode ser utilizado manualmente ou em equipamentos de extração de ácidos nucléicos automatizados.
• Para uso manual, é necessária uma rack magnética para microtubos de 1,7 mL.
• Para uso em sistemas automatizados, os componentes fornecidos podem ser distribuídos em placas deep well específicas de cada equipamento.
• Workstation para PCR, micropipetas de volume variável (0,5 a 1000 μL).
• Insumos: Microtubos de 1,0 a 2,0 μL, 0,2 μL, ponteiras (0,5 a 1000 μL).

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