PCR-Mix 2X concentrada (MgCl2 [1,5 mM], Taq 0,5U, dNTPs [200µM] – 100 reações de v. f. 50 µL) volume total: 2,5mL | 13-11250-01

Catálogo nº: 13-11250-01
Apresentação: 100 reações
Armazenamento: – 20ºC

Misture bem antes de usar

DESCRIÇÃO:

A PCR Mix LGC foi otimizada para utilização em rotinas de laboratório para amplificação de fragmentos de DNA de 0,2 a 2,0 kb por PCR. É uma solução pronta para o uso que contém enzima Taq DNA Polimerase, dNTPs, MgCl₂ e tampões de reação em concentrações ideais para a amplificação de DNA e cDNA através da técnica de PCR.

COMPONENTES:
Cada sistema contém quantidade de reagentes suficiente para realizar 100 reações de amplificação por PCR em volume final de 50µL.

2 microtubos contendo:

• 1.250 µL PCR Mix LGC, 2X

2 microtubos contendo:

• 1.000 µL Água ultra-pura DEPC tratada, livre de endonucleases.

PCR Mix LGC, 2X:·   Taq DNA Polimerase (2,5 U reação) em concentração e tampão de reação adequados, (Tris-HCl pH: 8,5, KCl),

·   200 mM cada dNTP,

·   1,5 mM MgCl₂,

PROCEDÊNCIA DA ENZIMA:
A Taq DNA Polimerase recombinante é obtida da bactéria Thermus aquaticus e expressa em E. coli.

CONTROLE DE QUALIDADE:

Ensaios funcionais: A PCR Mix LGC é testada quanto a sua performance através da reação de amplificação em cadeia da polimerase (PCR), do fragmento de 452 pb correspondentes ao gene da gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase humano (GAP). O produto de PCR é visualizado em géis de agarose 1,5% sob luz ultravioleta.

PROTOCOLO BÁSICO:
Para cada reação no volume final de 50 µL, separar 25 µL da PCR MIX LGC 2X e adicionar o DNA molde, os primers e água purificada em volume total de 25 µL (os volumes podem ser aumentados proporcionalmente a este calculo básico).

ATIVIDADE ENZIMÁTICA ASSOCIADA:
A enzima Taq DNA polimerase contida na PCR MIX LGC 2X apresenta atividade de polimerização 5’ – 3’, dependente da atividade de substituição da exonuclease, porém carece de atividade de exonuclease 3’  –  5’.

OBS: ESTE PRODUTO É UTILIZADO ESTRITAMENTE EM PESQUISA CIENTÍFICA, NÃO RECOMENDADO PARA O USO EM DIAGNÓSTICO CLÍNICO OU TERAPÊUTICO